北纳生物-北京北纳创联生物技术研究院

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DH5α大肠杆菌-北纳生物
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DH5α大肠杆菌

Escherichia coli DH5α
  • 价格: ¥500
  • 编号:BNCC353719
  • 交付:当天
  • 品牌:BNCC
规格:
  • 冻干粉
    冻干粉:冻干菌粉、冻干管 ,一次性用完、不得留存
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DH5α大肠杆菌基本信息
培养基 基础培养基(LB):酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。
传代方法 ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板; ②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎; ③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管,充分溶解后重新打回液体试管中,混匀; ④吸取0.2mL菌悬液打入平板中,涂布均匀,重复两次获得两个平板; ⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。222
生长条件 37℃;18-24h;好氧
存储条件 2-8℃
安全等级 1
应用领域 克隆菌株
共享方式 公益性共享

菌种名称: DH5α大肠杆菌 Escherichia coli DH5α

储藏条件: -20℃

有效期: 5 年

编号: 353719

产品形式: 菌片,西林瓶

安全等级: 1 级,超净台或生物安全柜操作

用途: 感受态细胞,质粒,基因工程

*注意:本产品为常温运输,收货后请置于-20℃保存。当天发现破损等异常情形,请在 24 小时内及时联系客服;西林瓶开启后一 次用完,不得留存。请严格按照本说明进行操作,否则造成菌种异常、失活等情形,不予提供补发服务。

培养基:LB 琼脂培养基 酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min 灭菌。

培养条件                                 温度:37℃                                          气体环境:好氧

使用方法

A.活化

1.准备 LB 平板 2 块;

2.无菌环境下,在西林瓶中打入 0.5mL 液体培养基,充分溶解菌片;

3.将悬液在平板划线培养,2 块平板,18-24h 长出单菌落;

B.感受态制备(供参考)

1.大肠杆菌 DH5α平板上挑取一个单菌落接于 3ml LB 液体培养基的试管中,37 ℃震荡培养过夜。

2.取 1ml 菌液转接到一个含有 50ml LB 液体培养基的锥形瓶中,37 ℃震荡培养 2~3h,A600 应在 0.4~0.5 之间,细胞数务 必﹤10 8CFU/ml。

3.用移液枪取 1ml 菌液转移到 1.5 ml 离心管中,冰上放置 10min 。

4.离心 10min,4000r/min。

5.倒尽培养液,用冰冷的 0.1mol/l CaCl2 200 µl 悬浮沉淀,立即放在冰上保温 30min 。

6.低温离心 10min,4000r/min,回收细胞。

7.用冰冷的 0.1mol/l CaCl2 200µl 悬浮细胞。

8.分装细胞,毎 200ul 一份,此细胞为感受态细胞。

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