北纳生物-北京北纳创联生物技术研究院

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Stbl3(含pAdEasy-1质粒)大肠杆菌-北纳生物
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Stbl3(含pAdEasy-1质粒)大肠杆菌

Escherichia coli Stbl3(pAdEasy-1)
  • 价格: ¥1000
  • 编号:BNCC359022
  • 形式:冻干粉
  • 交付:当天
  • 品牌:BNCC
基本信息 查看证书 相关资源
Stbl3(含pAdEasy-1质粒)大肠杆菌基本信息
培养基 LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
传代方法 ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管,充分溶解后重新打回液体试管中,混匀;④吸取0.2mL菌悬液打入平板中,涂布均匀,重复两次获得两个平板;⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
生长条件 37℃;18-24h;好氧;
存储条件 2-8℃
安全等级 1
应用领域 pAdEasy-1质粒提取。
共享方式 公益性共享

Stbl3(含 pAdEasy-1质粒)大肠杆菌

Escherichia coli Stbl3 (pAdEasy-1)

储藏条件: 2~8℃

编号: 359022

产品形式: 200μL冻干粉

有效期: 6年

安全等级: 1级,超净台或安全柜操作

收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;干粉一次用完不得留存。请严格按照本说明进 行活化,否则造成菌种异常、失活等情形,不予提供补发服务。

宿主菌:BNCC353822 Stbl3。

质 粒:BNCC356414 pAdEasy-1(含氨苄青霉素抗性基因)。

培养基:LB 抗性琼脂培养基 酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,琼脂 15.0 g(液体培养基不含),蒸馏水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min 灭 菌。 灭菌结束,冷却降温后 加入氨苄青霉素钠,使培养基中氨苄青霉素钠最终含量为 50μg/mL。

培养条件:37℃ 好氧 18-24h。

活化步骤:

1. 准备无菌液体试管 1 支(含培养基 5~10mL),90mm 平板 2 块;

2. 安瓿管表面消毒后在安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上 无菌水使之破裂,随后用镊子 将其敲碎;

3. 吸取 0.5mL液体培养基打入冻干管,充分溶解后重新打回液体试管 中,混匀;

4. 从试管液体中吸取混合液涂布平板,200μL/个;

5. 将试管和平板全部置于上述指定条件培养,禁止密封缠绕平板, 18-24h 后观察培养液明显浑浊,平板菌落或菌苔生长;

6. 如菌种未生长,应继续培养至 72h,直至长出单菌落或者菌苔。

                                                

质粒纯化:

1、挑取单菌落接种到 50mL 液体 LB 抗性培养基中,37℃ 震荡培养过夜;

2、根据实验需求,吸取适量菌液进行质粒抽提。

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