北纳生物-北京北纳创联生物技术研究院

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pCBASceI-北纳生物
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pCBASceI

pCBASceI
  • 价格: ¥1200
  • 编号:BNCC358007
  • 形式:质粒干粉
  • 交付:当天
  • 品牌:BNCC
基本信息 相关资源
pCBASceI基本信息
培养基 LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
传代方法 1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min; 2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min; 3.热激导入: 42℃静置 90s; 4.收缩膜孔: 冰浴 2min; 5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min; 6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。 7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
生长条件 LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,5665bp)
存储条件 2-8℃
安全等级 0
应用领域 科研
共享方式 公益性共享
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